目前,
細胞因子生物學活性檢測和濃度測定方法主要有以下幾類:
一.生物學檢測法
生物學檢測又稱生物活性檢測,是根據細胞因子特定的生物活性而設計的檢測法。由于各種細胞因子具有不同的活性,例如il-2促進淋巴細胞增殖,tnf殺傷腫瘤細胞,csf刺激造血細胞集落形成,ifn保護細胞免受病毒攻擊,因此選擇某一細胞因子*的生物活性,即可對其進行檢測。生物活性檢測法又可分為以下幾類:
1.細胞增殖法
許多細胞因子具有細胞生長因子活性,特別是白細胞介素,如il-2刺激t細胞生長、il-3刺激肥大細胞生長、il-6刺激漿細胞生長等。利用這一特性,現已篩選出一些對特定細胞因子起反應的細胞,并建立了只依賴于某種因子的細胞系,即依賴細胞株鑒定il-2的含量。除依賴株外,還有一些短期培養的細胞,如胸腺細胞、骨髓細胞、促有絲分裂原刺激后的淋巴母細胞等,均可作為靶細胞來測定某種細胞因子活性。
2.靶細胞殺傷法
是根據某些細胞因子能在體外殺傷靶細胞而設計的檢測方法。通常靶細胞多選擇體外長期傳代的腫瘤細胞株,利用同位素釋放法或染料染色等方法判定細胞的殺傷率。
3.細胞因子誘導的產物分析法
某些細胞因子可刺激特定細胞產生生物活性物質,如il-2、il-3誘導骨髓細胞合成胺、il-6誘導肝細胞合成α1-抗糜蛋白酶等。通過測定所誘生的相應產物,可反映細胞因子的活性。