細(xì)胞因子中不含載體蛋白或其他添加劑(如A、HAS或蔗糖等)，并且通常以較少量的鹽來進(jìn)行凍干處理，因此微量的細(xì)胞因子在凍干過程中會沉積于管內(nèi)，形成很薄或不可見的蛋白層。所以我們建議在收到產(chǎn)品后，務(wù)必在開蓋前先離心，使粘在管蓋或管壁。細(xì)胞因子中不含載體蛋白或其他添加劑(如A、HAS或蔗糖等)，并且通常以較少量的鹽來進(jìn)行凍干處理，因此微量的細(xì)胞因子在凍干過程中會沉積于管內(nèi)，形成很薄或不可見的蛋白層。所以我們建議在收到產(chǎn)品后，務(wù)必在開蓋前先離心，使粘在管蓋或管壁上的蛋白聚集于管底(此時能否見到白色沉淀均屬正常現(xiàn)象)。
 

　　細(xì)胞因子常用的標(biāo)本類型：
 

　　全血：使用肝素鈉抗凝的真空采血管采血，不易采用肝素鋰、EDTA和ACD抗凝劑，血樣在8小時內(nèi)分析，超過8小時會導(dǎo)致活性的損失，一般細(xì)胞因子陽性細(xì)胞會減少5%。如不能在8小時之內(nèi)檢測，應(yīng)將真空采血管水平室溫放置。
 

　　自身血漿中外周血單個核細(xì)胞(PBMCs)：使用肝素鈉抗凝的采血后，分離PBMCs，24小時內(nèi)分析。
 

　　組織培養(yǎng)基中的外周血單個核細(xì)胞(PBMCs)：用Ficoll分離PBMCs，將細(xì)胞重懸于含10%熱滅活胎牛血清(FBS)的RPMI-1640培養(yǎng)基中，調(diào)節(jié)細(xì)胞濃度為2×106細(xì)胞/ml。
 

　　調(diào)節(jié)細(xì)胞濃度2×106細(xì)胞/mL于新鮮培養(yǎng)基中。
 

　　冰凍全血與PBMCs：使用1×紅細(xì)胞裂解液處理活化的外周血或者PBMCs，用PBS漂洗，并用含1%的BSA及10%的DMSO的PBS重懸，-70℃凍存。溶化后細(xì)胞置于染色管中，加上2～3mL的洗液，離心5分鐘后，用破膜劑對細(xì)胞進(jìn)行破膜和染色。