五月天丁香婷婷综合久久-五月天第一页-五月天爱爱网-五月天爱爱-五月天sese-五月天com

技術文章

瓊脂糖凝膠電泳點擊次數:2222 更新時間:2016-04-26

  瓊脂糖凝膠電泳是分離鑒定和純化DN段的常用方法。DNA分子在瓊脂糖凝膠中泳動時有電荷效應和分子篩效應,DNA分子在高于等電點的pH溶液中帶負電荷,在電場中向正極移動。由于糖磷酸骨架在結構上的重復性質,相同數量的雙鏈DNA幾乎具有等量的凈電荷,因此它們能以同樣的速度向正極方向移動。不同濃度瓊脂糖凝膠可以分離從200bp至50kb的DN段。在瓊脂糖溶液中加入低濃度的溴化乙錠(ethidum bromide ,EB),在紫外光下可以檢出 10ng的DNA條帶,在電場中,pH8.0條件下,凝膠中帶負電荷的DNA向陽極遷移。

  瓊脂糖凝膠有如下特點:

  (1)DNA的分子大小 在凝膠基質中其遷移速率與堿基對數目的常用對數值成反比,分子越大遷移得越慢。

  (2)瓊脂糖濃度 一個特定大小的線形DNA分子,其遷移速度在不同濃度的瓊脂糖凝膠中各不相同。DNA電泳遷移率(u)的對數與凝膠濃度(t)成線性關系。

  (3)電壓 低電壓時,線狀DN段遷移速率與所加電壓成正比。但是隨著電場強度的增加,不同分子量DN段的遷移率將以不同的幅度增長,隨著電壓的增加,瓊脂糖凝膠的有效分離范圍將縮小。要使大于2kb的DN段的分辨率達到,所加電壓不得超過5v/cm。

  (4)電泳溫度 DNA在瓊脂糖凝膠電泳中的電泳行為受電泳時的溫度影響不明顯,不同大小的DN段其相對遷移速率在4℃與30℃之間不發生明顯改變,但濃度低于0.5%的凝膠或低熔點凝膠較為脆弱,在4℃條件下電泳。

(5)嵌入染料 熒光染料溴化乙錠用于檢測瓊脂糖凝膠中的DNA,染料嵌入到堆積的堿基對間并拉長線狀和帶缺口的環狀DNA,使其剛性更強,還會使線狀遷移率降低15%。

(6)離子強度 電泳緩沖液的組成及其離子強度影響DNA電泳遷移率。在沒有離子存在時(如誤用蒸餾水配制凝膠,電導率zui小,DNA幾乎不移動,在高離子強度的緩沖液中(如誤加10×電泳緩沖液),則電導很高并明顯產熱,嚴重時會引起凝膠熔化。

  對于天然的雙鏈,常用的幾種電泳緩沖液有TAE、TBE等,一般配制成濃縮母液,室溫保存,用時稀釋。

電話:
13788993509
13788995069
021-64133189
傳真:
021-64129208
陳小姐點擊這里給我發消息
徐小姐點擊這里給我發消息
朱小姐點擊這里給我發消息
 
安全聯盟站長平臺

化工儀器網

推薦收藏該企業網站
主站蜘蛛池模板: 思久久 | 91在线一区二区三区 | 四虎影业 | 特黄a级三级三级野战 | 天天射久久| 幻女free性zozo交体内谢 | 久久精品免视看国产 | 日韩视频免费观看 | aigao视频| 成人福利在线播放 | 操老逼| 国产成人综合网 | 日韩无遮挡大尺度啪啪影片 | 视频网站入口在线看 | 午夜性爽视频男人的天堂在线 | 白丝校花被扒开双腿喷水小说 | 3x免费高清视频 | 西西人体大胆啪啪私拍色约约 | 欧美18一videos极品 | 小寡妇好紧进去了好大看视频 | 扒开双腿猛进入爽爽视频ai | 视频大全在线观看免费 | 国内精品久久久久影院中国 | 久久精品嫩草影院免费看 | 欧美日韩精品一区二区三区视频 | 天天插在线视频 | 欧美kkk4444在线观看 | 美女机机对机机的视频(免费) | 性xxxxⅹhd成人 | 厕所rxxx| 国产精品日本一区二区三区在线看 | 色综合视频一区二区观看 | 欧美亚洲国产综合在线 | 无遮无挡免费视频 | 狠狠色综合久久婷婷色天使 | 日韩一区二区三区四区五区 | 成年人免费看的视频 | 国产精品女主播大秀在线 | 免费xxxx日本大片在线观看 | 高h辣文小说网 烧书阁 | 免费高清资源黄网站在线观看 |